للفائدة العلمية احببت ان أضيف خلاصة اطروحتي للماجستير مع بعض صور المناقشة
عنوان الاطروحة
تقييم مصلي و نسيجي لبعض اللّقاحات التجارية المتوفرة لمرض التهاب جراب فابريشيا المعدي في دجاج أللحم
الخلاصة
صممت الدراسة لتقييم ثمانية لقاحات تجارية حية مستخدمة ضد مرض التهاب الجراب المعدي. أستخدم في هذه التجربة أربعمائة وستون طير بعمر يوم واحد نوع روز قسمت الافراخ عشوائيا الى تسعة مجاميع كل مجموعه تكونت من خمسين طير. لقحت المجاميع الاولى والثانية والثالثة والرابعة باللقاح متوسط الضراوة في حين تم تلقيح المجموعة الخامسة والسادسة والسابعة والثامنة باللقاح عالي الضراوة, وتم تلقيح المجاميع الثمانية بطريقة بعمر 14 يوم عن طريق الحقن داخل الحوصلة وفي نفس الوقت والمجموعة التاسعة لم تستلم لقاح واعتبرت كمجموعة سيطرة.
استخدمت معاير مختلفة في تقيم هذه اللقاحات تضمنت العلامات السريرية والآفات العيانيه التي تتبع التلقيح واختبار الاليزا غير مباشر كذلك نسب وزن الجراب و الطحال و التوثة والفحص النسيجي للجراب والطحال والتوثة وكذلك قياس الاجهاد الحاصل بعد التلقيح من خلال قياس هرمون الكورتيكوستيرون باستخدام فحص الاليزا التنافسي.
جمعت عينات الدم في اليوم الاول من عمر الطيور لتحديد مستوى المناعة الموروثة من الام بينما جمعت عينات الدم في الايام 21و28و35 من عمر الطير لتحديد الاجسام المضادة ضد مرض التهاب الجراب المعدي في حين جمعت عينات الدم في اليوم الاول والثاني والثالث بعد التلقيح للكشف عن هرمون الكورتيكوستيرون.
جمعت عينات الاعضاء (الجراب والطحال والتوثة ) في اليوم 17 و28 من العمر لقياس منسب تلك الاعضاء وللفحص النسيجي المرضي.
اوضحت النتائج عدم ظهور علامات سريرية او هلاكات في المجاميع كافة طوال فترة التجربة لكن الآفات العيانية شوهدت في الافراخ الملقحة بعد مرور 3 ايام من التلقيح لأربع طيور من المجموعة الخامسة وخمسة طيور في المجموعة الثامنة, تلك الآفات تضمنت انتفاخ الجراب وانتفاخ الكلى وامتلائها براسب اليوريت.
بينت نتائج منسب الجراب ان المجموعة 4و5و7و8 أظهرت زياده معنوية (P<0.05) في اليوم السابع عشر من عمر الطيور. في حين المجموعة 4و5و8 اظهرت نقصان معنوي واضح (P<0.05) في اليوم الثامن والعشرين من عمر الطيور وهذا يشير الى ضمور الجراب بالمقارنة مع مجموعة السيطرة والمجاميع الملقحة الاخرى.
كشفت نتائج منسب الطحال الى وجود نقصان معنوي (P<0.05) للمجاميع 4و5و8 في اليوم الثامن والعشرون من العمر بالمقارنة مع مجموعة السيطرة والمجاميع الملقحة الاخرى. المجموعة الرابعة ملقحة باللقاح متوسط الضراوة والمجموعتان 5و8 باللقاح عالي الضراوة.
اشارة نتائج منسب التوثة الى وجود نقصان معنوي (P<0.05) للمجاميع 1و5و8 في اليوم 28 من العمر بالمقارنة مع مجموعة السيطرة والمجاميع الملقحة الاخرى. المجموعة الاولى لقحت باللقاح المتوسط الضراوة.
أوضحت نتائج الفحص النسيجي بأن كل اللقاحات أصابت الجراب وأظهرت درجات مختلفة من التغيرات النسيجية المرضية. اظهرت اعضاء الطيور في المجموعة 1و2و4 التي لقحت باللقاح متوسط الضراوة درجات مماثله امتازت بالوذمة وانحطاط في منطقة لب جريبات غدة فابريشيا. ولوحظ احتقان الجيوب وتنخر جريبات الطحال للمجموعة 1و2 بينما امتازت المقاطع النسيجية للطحال في المجموعة 4 بالتنكس مائي للطبقة الظهارية. اما مقاطع التوثة فأظهرت نضوب الخلايا اللمفاوية واحتقان ونزف في منطقة لب التوثة للمجاميع 1و2و4. اما جراب فابريشيا في المجموعة 3 اظهرت تثخن محفظة الجراب وكذلك اظهر الطحال تنكس مائي في الطبقة الظهارية للوعاء الدموي بينما لوحظت بؤر متعددة من النزف في التوثة. التغيرات النسيجية في جراب فابريشيا كانت متشابه في مجموعه 6و7 من أثر التلقيح باللقاح عالي الضراوة تمثلت بالوذمة والتليف. امتازت المقاطع النسيجية الطحال للمجموعتين 6و7 باحتقان الأوعية الشعرية وازدياد عدد الجريبات المولدة للخلايا , أظهرت مقاطع التوثة النسيجية للمجموعة 6 احتقانا شديدا ونزفاً, اما المجموعة 7 فكانت أقل احتفاناً مع بؤر متعددة من النزف. بينت المقاطع النسيجية للمجموعة5 و8 التي لقحت باللقاح عالي الضراوة تغيرات نسيجية شديده ممثلة بالدمار الشديد في جراب فابريشيا والطحال وأظهرت مقاطع التوثة للمجموعة 5و8 نضوب الخلايا اللمفاوية مع احتقان وبؤر نزفيه في لب التوثة.
بينت نتائج فحص الاليزا لعشرة افراخ في اليوم الاول من عمر الطيور وجود مناعة أمية =4852±745 .وأظهرت النتائج الى وجود فرق معنوي(P<0.05) بين متوسط معيار الاجسام المضادة لكل المجاميع الملقحة في 21و28و35 يوم من العمر بعد التلقيح بالمقارنة مع مجموعة السيطرة, وهذا يدل على ان كل اللقاحات الثمان حفزت تكوين الاجسام المضادة. وأوضحت النتائج ان المجاميع الملقحة باللقاح عالي الضراوة احدثت اعلى معيار من الاجسام المضادة من تلك التي لقحت باللقاح متوسط الضراوة واعلى مستوى من معيار الأجسام المضادة قد سجل في المجموعة 5و8 على طوال التجربة.
نتائج فحص الاليزا التنافسي اشارت الى وجود زياده معنويه (P<0.05) في مستوى هرمون الكورتيكوستيرون للمجموعة 5 في 24 ساعه بعد التلقيح, بينما اعلى زياده معنويه (P<0.05) في مستوى هرمون الكورتيكوستيرون كانت في مجموعه 4و5و8 بعد 48 ساعه من التلقيح, وكان هنالك زياده معنويه (P<0.05) للمجموعة 5و8 في 72ساعه بالمقارنة مع مجموعة السيطرة.
اثبتت الدراسة ان اللقاحات NOBILIS D78, VOLVA IBDMLV, GUMBORO VAC, NOBILIS E228, HIPRA GUMBORO-GM97 كافيه لإنتاج معيار جيد من الاجسام المضادة وانها اقل او متغايرة الانتشار في الاعضاء وكذلك لا تنتج حالة اجهاد للطيور الملقحة. ولا توصي الدراسة باستخدام اللقاحات BURSINE-2, AVIPRO PRECISE, BURSINE PLUS بسبب الاذى الواسع لتلك اللقاحات على الاعضاء ,وتنتج حاله من الاجهاد على الطيور الملقحة.
Serological and Histological Evaluation of Some Commercial Infectious Bursal Disease Vaccines in Broilers
Summary
This study was designated to evaluate eight commercial live vaccines against infectious bursal disease. Four hundred and sixty, 1-day-old ROSS broiler chicks divided randomly into 9 groups. Each group consist of 50 birds, groups 1, 2, 3 and 4, were vaccinated with an intermediate vaccines, whereas groups 5, 6, 7 and 8 were vaccinated with an intermediate plus vaccines. The vaccines were given by intracrop route at 14 days of age. The last one was acted as control unvaccinated group.
Different parameters were used to evaluate these vaccines including; clinical signs and gross lesions following vaccination, indirect ELISA test, lymphoid organs (bursa of Fabricius, spleen, and thymus) to body weight index, histopathological examination of bursa, spleen, and thymus as well as measurement of post vaccination stress by measuring of corticosterone hormone by using competitive ELISA test.
Blood samples were collected at the 1st days of old for detection of maternal derived antibody (MDA), whereas blood samples has been collected from all groups at 21st, 28th and 35th day of life post vaccination for detection IBD antibody titer while blood samples were collected at 24hrs, 48 hrs and 72 hrs. post vaccination for detection of corticosterone hormone. Bursa, spleen and thymus were removed at 17th and 28th days of age to estimated organ index and histopathological changes.
The results did not reveal any clinical signs or mortality in all groups throughout the experiment. Gross lesions were observed in the chicks of vaccinated groups after 3 days post vaccination during the experiment in four birds of group 5, and five birds of group 8 that included swollen bursa and kidneys that filled with white urate deposits.
The result of the bursal index showed that birds from group 4, 5, 7 and 8 had significant increase (P<0.05) in BI at 17th day of age. Whereas groups 8, 5 and 4 had significant reduction (P<0.05) in BI at 28th days of age which indicated bursal atrophy as compared with control and other vaccinated groups.
Spleen index revealed that significant reduction of spleen index (P<0.05)which was noted in group 4 ,5 and 8 at 28th days of age as compared with control and other vaccinated groups throughout the experiment.
Thymus index indicated that significant reduction (P<0.05) in group1, 5 and 8 at 28th days of chickens age as compared with control and other vaccinated groups. Group1, which was vaccinated with intermediate vaccines.
Histological examination of bursa of Fabricius, spleen and thymus revealed that all type of vaccines induced different degree of alterations in these organs. The organs of birds in group1, 2, and 4, which were vaccinated with intermediate vaccines showed similar degree of changes which characterized by an edema and degeneration in the medullary area of bursal follicles were observed in bursa. Spleen from group1 and 2 showed follicular necrosis and sinusoidal congestion, whereas spleen section obtained from group 4 showed hydropic degeneration in the epithelial layer. Thymus section obtained from group1, 2, 4 represented by congestion and hemorrhage in the medulla with lymphocytic depletion. Bursa from group 3 showed thickened capsule. Spleen section showed hydropic degeneration in the epithelial layer of the blood vessels, whereas the thymus changes represented by focal area of hemorrhage. Whereas groups 6 and 7, which were vaccinated with intermediate plus vaccines, exhibited similar histopathological changes in bursa of Fabricious which represented by an edema, and fibrosis. Spleen sections were characterized by hyperplasia of germinal follicles and capillary congestion. Whereas thymus from group 6 showed severe congestion and hemorrhage , while thymus section from group 7 showed slight congestion and multifocal area of hemorrhage. Group 5and 8 which vaccinated with intermediate plus vaccine showed more severe histopathological changes which characterized by severe destruction of bursal structure and severe destruction of spleen structure. Thymus section of group 5and 8 were exhibited depletion of lymphocytes in medulla with multifocal area of hemorrhage and congestion.
Indirect ELISA test revealed that the mean of maternal derived antibody (MDA) at one day old chicks was 4852±745. Significant differences (P<0.05) among means of antibody titers of all vaccinated groups were found at 21st ,28th and 35th day of age compared with that of control group. The results also showed that groups which were vaccinated with intermediated plus vaccines exhibited high level of antibody especially groups 5 and 8 than those which vaccinated with intermediate vaccines.
The results of competitive ELISA test showed that significant increase (p<0.05) in the level of corticosterone (CS) hormone in group 5 at 24hrs, while the level of CS was highly significant increase (p<0.05) in group 4, 5 and 8 at 48 hrs post vaccination. However, there were significant increase (p<0.05) in group 5 and 8 at 72 hrs as compared with that of control group.
This study demonstrated that NOBILIS D78, VOLVA IBDMLV, GUMBORO VAC, NOBILIS E228, HIPRA GUMBORO-GM97 vaccines were able to produce sufficient antibody titers, and did not produce stressful conditions to the vaccinated birds.
The study does not recommend using of BURSINE-2, AVIPRO PRECISE, BURSINE PLUS vaccines because these vaccines are highly injurious to the bursa of Fabricius, spleen and thymus and produce stressful condition to the vaccinated birds
.
[ندعوك للتسجيل في المنتدى أو التعريف بنفسك لمعاينة هذه الصورة]